زراعة الخلايا في القارورة هي زراعة خلية شائعة يمكن استهلاكها ، وتستخدم أساسا لثقافة الخلايا المعلقة المختلفة ، ويمكن أيضا استخدام زجاجات صغيرة السعة لإعداد أو تخزين الوسائط. هذا النوع منمستهلكات المختبرات الطبيةيستخدم في ثقافة خلايا CHO. خلية CHO هي خط خلوي متحول ، تم الحصول عليه في ، ويستخدم على نطاق واسع للتعبير عن البروتين. على ثقافة تعليق خلية CHO ، أول من مدد الوسائط (CD CHO) في درجة حرارة الغرفة ، لاستعادة درجة حرارتها إلى درجة حرارة الغرفة ثم نقلها إلى 37 ℃ التسخين المسبق للسرير في غضون 30 دقيقة ، السائل المعاد تدويره يتحرك عصارة خلية البذور من أنبوب محفوظ بالتبريد تمتص إلى زراعة الخلية في قارورة تحتوي على تسخين مسبق المتوسطة ، إضافة كمية مناسبة من محلول المغذيات ، بدأت في التطور. يجب الانتباه إلى العملية المعقمة في عملية استعادة الخلايا ، ويجب أن تكون سرعة تحلل الخلايا المجمدة سريعة لتجنب تكوين بلورات الثلج في خلايا التسخين البطيئة وتلف الخلايا. بعد 2-3 أيام من الثقافة في زراعة الخلية في قارورة ، تزيد كثافة الخلايا ، وتنضب العناصر الغذائية تدريجيا ، لذلك تحتاج الخلايا إلى توسيع. تم حساب حجم التمدد وفقًا لكثافة الخلية. عندما تم الوصول إلى عدد الخلايا في المفاعل ، تم إيقاف الثقافة وتطهيرها إلى المفاعل للتوسع. عندما تتم زراعة تعليق خلايا CHO باستخدام زراعة الخلايا في قارورة ، من الضروري عمومًا أن تهتز بانتظام بمساعدة الهزاز لمنع تراكم الخلايا والتأثير على نموها وتكاثرها. أثناء التشغيل ، يجب الانتباه إلى العقم لتجنب إدخال التلوث الجرثومي بسبب التشغيل غير السليم ، مما سيسبب تأثيرات ضارة على نمو الخلايا.
منحنى نمو الخلايا هو طريقة شائعة لتحديد عدد النمو المطلق للخلايا ومؤشر مهم لتحديد قابلية الخلية للحياة. كما أنها واحدة من المعايير الأساسية للخصائص البيولوجية للخلايا المستزرعة. هناك العديد من الطرق لتحديد منحنى نمو الخلايا ، والعد حسب قارورة زراعة الخلايا هو وسيلة شائعة. طريقة منحنى النمو المستخدمة عادة هي: بنفس مواصفات زراعة الخلايا في زجاجة ، يتم تلخيصها بنفس الكمية من خلايا الجيل نفسه ، بعد التدريب كل 24 ساعة لإخراج بضع زجاجات من عدد الخلايا ، لتعزيز الأبسيسا يدل على الوقت ، عدد خلايا السجل الزمني المختلف للإحداثيات السفلية ، والعلامة ، والخط المستقيم عند نقاط مختلفة لمنحنى نمو الخلايا ، يمكن أن يعكس ديناميكية نمو الخلايا. باستخدام طريقة عد قارورة زراعة الخلايا لتحديد منحنى نمو الخلايا لا يمكن فقط فهم المعايير الأساسية للخصائص البيولوجية للخلايا المستزرعة ، وتحديد العدد المطلق لنمو الخلايا ، والحكم على صلاحية الخلايا ، ولكن يمكن استخدامها أيضًا لتحديد تأثير العوامل الخارجية مثل الأدوية على نمو الخلايا.
